tac vektory pro vysokou úroveň bakteriální exprese

tac Vektory pro bakteriální expresi na vysoké úrovni

• Možnosti cytoplazmatické exprese nebo sekrece
• FLAG^® vektory pro vysoce citlivou detekci a purifikaci pomocí ANTI-FLAG^® protilátek, pryskyřic a destiček
• MAT™ vektory pro vysoce kvalitní purifikaci pomocí pryskyřic HIS-Select™ a 96jamkových destiček
• N- nebo C-koncové fúze
• Vektory SHIFT™ pro expresi ve všech třech čtecích rámcích
• Enterokinázové odstranění N-koncových značek FLAG
• Expression kits available

tac Vlastnosti vektoru

Bakteriální .tac promotorové vektory umožňují expresi, detekci a purifikaci rekombinantních fúzí FLAG a MAT (Metal Affinity Tag) v E. coli. Tyto vektory nabízejí možnost volby periplazmatické (+ompA) nebo cytoplazmatické exprese amino- nebo karboxy-terminálně značených fúzí. tac expresní vektory poskytují rezistenci vůči ampicilinu pro snadnou selekci pozitivních transformantů. Vektory navíc obsahují transkripční terminátor T1T2, původ replikace pMB1(derivát pBR322), původ f1 a gen lacI pro potlačení tac promotoru. Vektory využívající silný promotor tac (hybrid E. coli trp a lac promotory) nabízejí hladiny exprese proteinu přesahující 10 mg/l kultury při použití IPTG jako de-represoru. Tyto vektory lze použít k expresi proteinu v jakémkoli zavedeném E. coli expresním hostiteli.

MAT Tag

Tag MAT neboli Metal Affinity Tag (HNHRHKH) byl vytvořen pro purifikaci rekombinantních fúzních proteinů MAT pomocí HIS-Select Nickel and Cobalt Affinity Gels. Produkty HIS-Select umožňují vysoce selektivní purifikaci fúzních proteinů značených histidinem, jako jsou fúzní proteiny MAT. Mnoho našich nejnovějších vektorů využívá značku MAT, často v kombinaci se známou značkou FLAG. Vektory obsahující značku MAT jsou nabízeny ve formátech pro značení na N-konci nebo na C-konci.

Vektory SHIFT

Vektory FLAG-SHIFT jsou k dispozici pro sekvence, u nichž není přesně definován amino-terminál. Tyto vektory obsahují sekvenci "shift", která umožňuje expresi inzertu ve všech třech čtecích rámcích, tedy bez ohledu na čtecí rámec, ve kterém byl původně klonován.

Odstranění značek FLAG z enterokinázy

Rozpoznávací sekvence pro enterokinázu, Asp-Asp-Asp-Asp-Lys, se nachází na C-konci epitopové značky FLAG. Odstranění FLAG je možné u všech fúzních proteinů obsahujících N-koncovou sekvenci FLAG. Fúzní proteiny s dvojitou značkou lze také štěpit enterokinázou za účelem odstranění jedné nebo více značek v závislosti na poloze FLAG v sekvenci proteinu.