Protokol bez RNázy a DNázy

Číslo výrobku: LD__Paragraph--L. 11119915001

Protokol

Podmínky pro rozklad RNázy

0.1 mU RNázy, bez DNázy rozloží 1 μg RNA za 30 minut při teplotě +37 °C v reakčním objemu 50 μl vody PCR kvality. Koncentrace bílkovin RNázy, bez DNázy je 0,5 μg/μL Specifická aktivita enzymu je 30 U/mg, což odpovídá 1,5 mU/μL; jeden mikrolitr přípravku RNázy stačí k úplnému rozkladu 15 μg RNA za 30 min. Protože přesná koncentrace RNA v biologických vzorcích není přesně známa a člověk obvykle chce RNA degradovat kvantitativně, doporučuje se nadbytek RNázy.

RNázy nemají specifické požadavky na reakční pufr: jsou aktivní v čisté vodě a v přítomnosti Tris nebo NaCl.

Chcete-li odstranit RNA ze vzorků, přidejte RNázu, bez DNázy a inkubujte při teplotě +15 až +25 °C nebo +37 °C.

Například přidejte 0,5 μl RNázy k nukleovým kyselinám z 10⁶ buněk a inkubujte při teplotě +15 až +25 °C nebo +37 °C. Pro nukleové kyseliny z 10⁷ buněk přidejte 1,5 μl RNázy a inkubujte 30 minut při teplotě +37 °C. Pro nukleové kyseliny z 10⁸ buněk přidejte 16 μl RNázy a inkubujte 30 min při + 37 °C.