C2399

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

Name: コラゲナーゼ <I>Clostridium histolyticum</I>由来
Brand: SIGMA

0.2 μm filtered, high purity, purified by chromatography, Type VII-S, ≥4 FALGPA units/mg solid, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

別名:

クロストリジオペプチダーゼA

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About This Item

CAS Number:

9001-12-1

EC Number:

3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)

EC Number:

232-582-9

MDL番号:

MFCD00130830

UNSPSCコード:

12352204

NACRES:

NA.54

主要文書

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品質水準

200

無菌性

0.2 μm filtered

フォーム

lyophilized powder

比活性

≥4 FALGPA units/mg solid
≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

精製方法

chromatography

溶解性

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

保管温度

−20°C

アプリケーション

Clostridium histolyticum（クロストリジウムヒストリチクム）由来のコラゲナーゼは以下の用途に用いられています。

マウスにおける脳内出血の誘発
免疫蛍光染色のためのコラーゲン3Dゲルの消化
マウスにおける局所性血液溢出・出血の誘発

コラゲナーゼは、終末糖化産物（AGE）の研究を目的とした動脈組織の処理に用いられています。また、ヒト腫瘍、マウス腎、ヒト脳、肺、上皮、その他多くの組織の細胞分散に、他のプロテアーゼとともに用いられています。肝臓および腎臓の灌流試験、膵島の分離、非実質肝細胞の単離にも有用です。

生物化学的／生理学的作用

Clostridium histolyticumには2種類のコラゲナーゼが含まれています。クロストリジウムコラゲナーゼは哺乳類コラゲナーゼよりも有効です。コラーゲン三重らせん体を複数部位で切断します。クロストリジウムコラゲナーゼはガス壊そにおける細菌侵入に関与しています。

コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。

組織から効果的に細胞を分離するには、コラゲナーゼ酵素と中性プロテアーゼの両方の作用が必要です。コラゲナーゼは酵素1モルあたり4 gのカルシウム原子（Ca²⁺）によって活性化されます。細胞ろ液には、分子量68～130 kDaの7種類以上のプロテアーゼ（至適pH：6.3～8.8）が含まれていると考えられます。コラゲナーゼは配列-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-を認識します。このXは、ほとんどの場合中性アミノ酸です。

単位の定義

1 コラーゲン消化単位（CDU）は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり　1.0 umol　の BAEE を加水分解します。