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DIGゲルシフトキット、第2世代

storage temp.:-20°C (-15°C to -25°C)

• UNSPSCコード: 41105500
• NACRES: NA.55

特性

• 詳細: New formulation containing Terminal Transferase, recombinant.
• 品質水準: 100
• メーカー／製品名: Roche
• 環境により配慮した代替製品の特徴: Designing Safer Chemicals; Learn more about the Principles of Green Chemistry.
• sustainability: Greener Alternative Product
• 環境により配慮した代替製品カテゴリ: , Aligned
• 輸送温度: dry ice
• 保管温度: −20°C (−15°C to −25°C)

詳細

詳細

DIGゲルシフトキット第2世代には、「ゲル移動度シフト」アッセイに使用する、オリゴヌクレオチドの非放射性3′末端標識のための試薬が含まれます。このキットには、DNA-タンパク質複合体の検出を容易にする提供品、電気泳動試薬および酵素標識抗体も含まれています。
DIGゲルシフトキットには組換えターミナルトランスフェラーゼが使用されており、ジゴキシゲニン(DIG)-11-ジデオキシウリジン三リン酸（ddUTP）によりきわめて柔軟性の高い標識反応を行えます。オリゴヌクレオチドの3′末端を標識するために使用できます（オリゴヌクレオチドが5′オーバーハング、3′オーバーハング、平滑末端のいずれであっても）。一本鎖DNAおよび二本鎖DNAの両方を標識できます。

メルクは、グリーン・ケミストリーの12原則の1つ以上に則った、より環境にやさしい代替製品（Greener Alternative Product）をお客様にご提供することをお約束いたします。この製品はさらに安全な化学品として設計されています。  DIGシステムは、放射能を使用した核酸の標識と検出に代わる高感度で費用対効果の高い核酸標識・検出手段として確立されました。DIGシステムの汎用性を証明する文書は多数発表されており、放射性標識は、ハイブリダイゼーションにおけるDNA標識の唯一の選択肢ではなくなりました。

アプリケーション

DIGゲルシフトキット第2世代は、配列特異的DNA結合タンパク質の非放射性検出に使用されています。DIGゲルシフトキットは、「ゲル移動度シフトアッセイ」においてDNA-タンパク質複合体を検出する非放射性、3′末端標識オリゴヌクレオチドプローブの調製に使用します。

特徴および利点

電気泳動アッセイは、DNA断片がより短い（30～100 bp）場合、最良に機能します。これはこれらの断片が、特定の結合部位の外側に配列を有する可能性は低いけれども、標的タンパク質と非特異的に相互作用することができるためです。

• 簡便：技法に特別な機器や技術を必要としないためです。
• 高い再現性：DIG標識プローブがいつまでも安定しているためです。
• 安全：アッセイが非放射性だからです。
• 高い信頼性：提供されるDIG標識コントロールオリゴヌクレオチドにより、アッセイが機能していることを確認できるためです。
• 機能テスト済み：キットとして提供されるコントロールを用いて（「品質」を参照）。
• 高感度：キットを用いて、わずか20 fmolのコントロールオリゴヌクレオチドを検出（キットプロトコールに従って標識した後）できるためです。

包装

16のコンポーネントから構成されている1キット。1キットで、DIG-11-ddUTPとの最大20のオリゴヌクレオチド3末端標識反応、200の結合反応、最大20ブロットに対する化学発光検出反応が可能、1キットに最大20のコントロール反応用のDNA結合タンパク質およびオリゴヌクレオチド入り

物理的形状

クロロフェノールレッド-β-D-ガラクトピラノシド、一ナトリウム塩

調製ノート

DNA-タンパク質相互作用の研究は、迅速かつ容易な「ゲル遅延」や「ゲル移動度シフト」アッセイにより、近年大幅に促進されています。遊離のDNAおよびDNA-タンパク質複合体は、ゲル電気泳動時に別々に移動するため、ネイティブ（非変性）ポリアクリルアミドゲルまたはアガロースゲルで分離および検出できます。

サンプル
量：3.85 pmolまたは100 ng
種類：5'-突出末端、3'-突出末端または平滑末端を有するオリゴヌクレオチド；1本鎖または2本鎖DNA断片（30～200 bp）
注：理想的には、標識する断片は30～100 bpでなければなりません。
所要時間
オリゴヌクレオチドのアニーリングと標識化：10分間
オリゴヌクレオチド-タンパク質複合体の形成：25分間
電気泳動：電気泳動システムに応じて1時間～一晩
ブロット法：1～2時間
免疫学的検出：2時間
X線フィルムまたはイメージャーへの露光：15～40分間

その他情報

ライフサイエンス研究専用です。診断にはご使用になれません。

キットの構成要素のみ

• Labeling Buffer 5x concentrated
• CoCl<SUB>2</SUB> Solution 25 mM
• DIG-ddUTP Solution, 1 mM Digoxigenin-11-ddUTP
• Recombinant Terminal Transferase 400 U/μl
• Binding Buffer 5x concentrated
• Control Oligonucletide ds 39mer, unlabeled 0.1 μg/μl, 3.85 pmol/μl
• DIG-labeled Control Oligonucleotide ds 39mer 0.4 ng/μl, 15.54 fmol/μl
Control Factor Oct2A 25-75 ng/μl
Poly [d(I-C)] 0.1 μg/μl
Poly [d(A-T)] 0.1 μg/μl
Poly L-lysine 0.1 μg/μl
Loading Buffer without bromophenol blue
Loading Buffer with bromophenol blue
Anti-Digoxigenin-AP 750 U/ml
CSPD 10 mg/ml
Blocking Reagent

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安全性情報

• ピクトグラム: GHS07,GHS08,GHS09
• シグナルワード: Danger
• 危険有害性情報: H302 + H332 - H350i - H360F - H411
• 注意書き: P201 - P261 - P273 - P280 - P308 + P313 - P391
• 危険有害性の分類: Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - Carc. 1B Inhalation - Repr. 1B
• 保管分類コード: 6.1D - Non-combustible, acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
• WGK: WGK 3
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable