Značení a modifikace proteinů
Krok 1: Označení.Rozpusťte protein v pufru. Přidejte barvivo a míchejte 2 hodiny.
Krok 2: Purifikace.Kolonu vyrovnejte. Přidejte reakční směs, spusťte separaci. Shromážděte přečištěný roztok značeného proteinu.
Proteiny se skládají z polypeptidových řetězců a jejich biologické funkce jsou částečně určeny správným složením, velikostí a počtem reaktivních funkčních skupin přítomných v polypeptidovém řetězci. Schopnost zajistit modifikace proteinů specifické pro dané místo poskytuje výzkumníkům možnost zkoumat širokou škálu vlastností a jejich celkovou biologickou funkci. Technologie značení a modifikace proteinů zahrnují přidávání fluoroforů, biotinu a dalších malých molekul ke zkoumání interakcí mezi proteiny, skládání proteinů, ke zkoumání celkové struktury proteinů a jejich biologické funkce.
Doporučené kategorie
Vysoce kvalitní aminokyseliny, pryskyřice a činidla včetně Novabiochem® pro syntézu peptidů, organickou chemii a výrobky na zakázku.
Nabízíme komplexní portfolio anorganických a kovových nanomateriálů, funkcionalizovaných nanočástic a sad nanomateriálů pro vaše výzkumné potřeby.
Vyberte si z naší rozsáhlé nabídky suchých barviv a mořidel certifikovaných Komisí pro IVD a biologické barvení pro použití s výzkumnými a klinickými vzorky.
Objevte stavební bloky proteinových degradérů pro vytváření knihoven, jako jsou molekuly PROTAC®, pro účinnou degradaci cílových proteinů při buněčném screeningu.
Značení fluorescenčním proteinem
Objev a široké rozšíření zeleného fluorescenčního proteinu (GFP) je silným příkladem této technologie. GFP a jeho obdobné molekuly měly obrovský vliv na řadu oblastí studia a na naše chápání biologických procesů. Například inkorporace fluorescenčních značek na protilátky umožňuje detekci a kvantifikaci vysoce specifických proteinových komplexů ve tkáních nebo směrovou imobilizaci komplexů protilátka-protein pro aplikace ELISA a western blot. Významnou nevýhodou použití GFP je však to, že funkce proteinu může být narušena začleněním dalších proteinových značek této velikosti. Aby výzkumníci tento problém obešli, mohou použít menší fluorescenční značky ve srovnání s GFP, biotin nebo začlenit nepřirozené aminokyseliny, které obsahují biortogonální funkce.
Konjugace enzymu s proteinem
Inkorporace jedinečných enzymů nebo sond je další metodou, kterou výzkumníci používají ke značení proteinů. Mezi běžně používané konjugace enzymů s proteiny patří alkalická fosfatáza (AP) a křenová peroxidáza (HRP). Použití technologií značení enzymů a proteinů má řadu výhod, protože umožňují zesílení signálu, různorodé výstupy signálu a pro každý enzym je k dispozici mnoho substrátů. Mezi běžné výstupy signálu patří fluorescenční, chemiluminiscenční nebo kolorimetrická detekce. Díky různorodosti těchto signálových výstupů jsou vhodné pro aplikace založené na imunohistochemii (IHC) nebo imunofluorescenční detekci (IF) v buňkách a tkáních.
Novější technologie značení proteinů
V oblasti výzkumu nemocí a objevování léčiv jsou technologie cíleného odbourávání proteinů intenzivně studovány vědci za účelem identifikace nových cílů léčiv a potenciálních terapeutik. Technologie cílené proteolýzy a chimér využívá bifunkční molekuly, které jsou na jednom konci navrženy tak, aby se vázaly na cílový protein onemocnění, zatímco druhý konec se váže na E3 ligázu, která protein z buňky eliminuje. Kombinace specifičnosti těchto molekul k široké škále cílů onemocnění a jejich schopnost zacílit je na degradaci proteinů pomocí vnitřních buněčných systémů degradace proteinů z nich činí výkonnou technologii značení proteinů pro výzkum onemocnění.
Vyhledejte v našem vyhledávači dokumentů datové listy, certifikáty a technickou dokumentaci.
Související články
- Seznamte se s různými typy fosforylace, což je důležitý buněčný proces, který umožňuje ukládání energie přeměnou ADP na ATP. Porovnejte oxidační fosforylaci a fosforylaci na úrovni substrátu pomocí užitečných schémat.
- The basic structure of peptidoglycan (PGN) contains a carbohydrate backbone of alternating units of N-acetylglucosamine (GlcNAc) and Nacetylmuramic acid, with the N-acetylmuramic acid residues cross-linked to peptides.
- Peptide Modifications: N-Terminal, Internal, and C-Terminal
- Chromogenic and fluorogenic derivatives are invaluable tools for biochemistry, having numerous applications in enzymology, protein chemistry, immunology and histochemistry.
- Zjistěte více o hmotnostní spektrometrii, včetně toho, co to je, k čemu se používá a jak funguje.
- Zobrazit vše (74)
Související protokoly
- Tato stránka popisuje odstranění značek GST enzymatickým štěpením pomocí produktů Cytiva.
- This page shows coupling through the primary amine of a ligand with a NHS-activated Sepharose High Performance, NHS-activated Sepharose 4 Fast Flow and CNBr-activated Sepharose from Cytiva.
- This page how to remove histidine tags by enzymatic cleavage using GE Healthcare products.
- Tato stránka ukazuje, jak purifikovat nebo odstranit biotin a biotinylované látky pomocí streptavidinové sepharosy High Performance od společnosti Cytiva.
- Úvod do PAGE. Seznamte se s pozadím SDS-PAGE a protokolem pro separaci proteinů na základě velikosti v polyakrylamidovém gelu.
- Zobrazit vše (23)
Další články a protokoly
Jak vám můžeme pomoci
V případě jakýchkoli dotazů odešlete žádost o zákaznickou podporu
nebo se obraťte na náš tým služeb zákazníkům:
Pište custserv@sial.com
nebo volejte na +1 (800) 244-1173
Další podpora
- Chromatogram Search
Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample.
- Kalkulačky a aplikace
Web Toolbox - vědecké výzkumné nástroje a zdroje pro analytickou chemii, vědu o živé přírodě, chemickou syntézu a materiálovou vědu.
- Customer Support Request
Customer support including help with orders, products, accounts, and website technical issues.
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.
Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?