Proteína LIF recombinante de camundongo ESGRO^®

O fator inibidor da leucemia em camundongos (LIF, mLIF) promove a autorrenovação e a manutenção no longo prazo de células-tronco embrionárias (ES) de camundongo e células-tronco pluripotentes induzidas (iPS) através da supressão da diferenciação espontânea.

O suplemento de meio de LIF de camundongo ESGRO é fornecido em unidades/ml ativas para garantir o desempenho consistente de um lote para outro. Cada lote do suplemento ESGRO é submetido a testes de controle de qualidade rigorosos para garantir a inibição confiável da diferenciação de células-tronco pluripotentes de camundongo. O suplemento de LIF de camundongo ESGRO pode ser usado para culturas à base de ou sem alimentador de células-tronco embrionárias (ES) de camundongo e células-tronco pluripotentes induzidas (iPS).

Aplicações para o suplemento ESGRO incluem uso como reagente para manutenção in vitro do fenótipo pluripotente de células-tronco embrionárias de roedores.

PROTOCOLOS SUGERIDOS:

Células-tronco embrionárias Em culturas de células-tronco embrionárias pluripotentes D3 e MBL-1, observa-se rotineiramente que 1000 U do suplemento ESGRO por 1,0 ml de meio de cultura de tecido são necessárias para manter as células-tronco embrionárias com um fenótipo de células-tronco. Concentrações semelhantes de mLIF também foram usadas para transmissão em linhas germinativas de células-tronco embrionárias geneticamente alteradas (E3).

Na concentração recomendada, 10⁷ unidades de ESGRO são suficientes para 10,0 l de meio de cultura de tecido e 10⁶ unidades do suplemento ESGRO são suficientes para 1,0 l de meio de cultura de tecido.

Formato: Purificada

O suplemento ESGRO é fornecido na forma líquida como 10⁷ unidades em 1,0 ml de solução salina tamponada com fosfato, com 1% p/v de albumina sérica bovina (BSA) como transportador para estabilidade.

O suplemento ESGRO^® é fornecido filtrado com filtro estéril de 0,22 mícron e após ter testado negativo em testes de micoplasma.

O suplemento ESGRO é enviado em temperatura ambiente. Um pacote resfriado pode ser incluído, como uma cortesia ao cliente, mas realmente não é necessário. Testes de estabilidade extensos foram realizados com o suplemento ESGRO durante o desenvolvimento. Este produto é estável por pelo menos 18 meses a partir da data de fabricação, na forma concentrada ou diluído em meio de cultura de tecido estéril, sem perda de atividade das células-tronco embrionárias. Para armazenamento no longo prazo, recomenda-se que o suplemento ESGRO seja armazenado a 4 °C. Congelamento e descongelamento reduzem a potência. Recomenda-se que, antes do uso, o suplemento ESGRO seja diluído em meio de cultura de tecido estéril e dividido em alíquotas com uma concentração conveniente e, então, armazenado a 4 °C. Deve-se evitar congelar e descongelar. O produto é estável por, no mínimo, 7 dias a 37 °C, incubadora de 5% de CO2 durante a cultura de células-tronco embrionárias.

Atividade específica: O suplemento ESGRO^® é avaliado em células-tronco embrionárias de camundongo (D3 & MBL-1) e em células de leucemia mieloide M1 de roedores (4). Um padrão de 50 unidades é definido como a concentração do suplemento ESGRO, em 1,0 ml de meio de cultura de tecido, que induz a diferenciação de 50% de colônias de M1 (4). 10E7 unidades são equivalentes a cerca de 100 μg de proteína pura e são suficientes para tratar 10 l de meio de cultura de células-tronco embrionárias.

Ensaio com células-tronco embrionárias: Ensaio de inibição da diferenciação com 1000 unidades/ml de células de leucemia mieloide em roedores, M1: Atividade específica >/= 10⁸ unidades/mg

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

ESGRO is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany