Przejdź do zawartości
Merck
Strona głównaChromatografia cienkowarstwowaOznaczanie kofeiny w kawie przy użyciu wysokosprawnej chromatografii cienkowarstwowej

Oznaczanie kofeiny w kawie przy użyciu wysokosprawnej chromatografii cienkowarstwowej

Wprowadzenie

Wysokosprawna chromatografia cienkowarstwowa (HPTLC) jest bardzo przydatną techniką analityczną i wymaga niewielkiego przygotowania próbki, co zostało zilustrowane na przykładzie analizy kofeiny w kawie. W przypadku próbek gotowanej kawy przed analizą konieczna jest jedynie ekstrakcja i filtracja przez filtr strzykawkowy PTFE 0,45 μm. Płytka HPTLC została wstępnie kondycjonowana fazą ruchomą, a skaner TLC został użyty do oznaczenia ilościowego po zakończeniu rozdziału chromatograficznego.


Wyniki i dyskusja

Kofeina została wykryta w świetle UV przy 254 nm, hRf = 56, (Rysunek 1). Skonstruowano czteropoziomową krzywą kalibracyjną i wykorzystano ją do celów ilościowych (rysunek 2). Każda próbka była analizowana w trzech powtórzeniach wykonywane równolegle, co jest zaletą chromatografii planarnej w porównaniu zarówno z GC, jak i HPLC.

.

Opracowana płytka do wysokosprawnej chromatografii cienkowarstwowej (HPTLC) w świetle ultrafioletowym o długości fali 254 nm. Płytka wyświetla serię ponumerowanych pasm od 1 do 24, wskazując różne miejsca próbki. Przerywany prostokąt podkreśla obszar z tekstem "hRf = 56" pod nim, sugerując pomiar współczynnika retencji konkretnej plamki.

Rysunek 1.Rozwinięta płytka HPTLC przy 254 nm, dane chromatograficzne pokazane w tabeli powyżej.

Wykres przedstawiający serię punktów danych z dopasowaną do nich wielomianową linią regresji, wskazującą na silną korelację z wartością r równą 0,9970. Punkty danych są rozproszone wzdłuż linii, co sugeruje wysoki stopień dokładności procesu kalibracji.

Rysunek 2.Wykres kalibracji w trybie regresji wielomianowej (r = 0,9970).

Wnioski

Kofeina może być łatwo oznaczana ilościowo w różnych rodzajach kawy przy minimalnym przygotowaniu próbki przy użyciu wysokosprawnej chromatografii cienkowarstwowej.

Zaloguj się, aby kontynuować

Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.

Nie masz konta użytkownika?