ABE250

Przeciwciało przeciwko dimetylowi histonu H3 (Lys4)

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Synonim(y): H3 histone family, member T, histone 3, H3, histone cluster 3, H3, H3K4me2
• Kod UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Właściwości

• pochodzenie biologiczne: rabbit
• Poziom jakości: 100
• forma przeciwciała: affinity isolated antibody
• rodzaj przeciwciała: primary antibodies
• klon: polyclonal
• oczyszczone przez: affinity chromatography
• reaktywność gatunkowa: mouse, rat, human, chicken
• metody: ChIP: suitable (ChIP-seq); dot blot: suitable; immunocytochemistry: suitable; western blot: suitable
• numer dostępu NCBI: NP_003484.1
• numer dostępu UniProt: Q16695
• Warunki transportu: wet ice
• docelowa modyfikacja potranslacyjna: dimethylation (Lys4)
• informacje o genach: human ... HIST1H3F(8968)

Opis

Opis ogólny

Histon H3 jest jednym z pięciu głównych białek histonowych zaangażowanych w strukturę chromatyny w komórkach eukariotycznych. Posiadając główną domenę globularną i długi N-końcowy ogon, H3 jest zaangażowany w strukturę nukleosomów o strukturze "koralików na sznurku". N-końcowy ogon histonu H3 wystaje z kulistego rdzenia nukleosomu i może podlegać kilku różnym rodzajom modyfikacji epigenetycznych, które wpływają na procesy komórkowe. Modyfikacje te obejmują kowalencyjne przyłączanie grup metylowych lub acetylowych do aminokwasów lizyny i argininy oraz fosforylację seryny lub treoniny. Dimetylacja histonu H3 w pozycji Lys4 koreluje z aktywnością transkrypcyjną wielu genów.

Specyficzność

Oczekiwana szeroka reaktywność krzyżowa gatunków w oparciu o podobieństwo sekwencji.

To przeciwciało rozpoznaje histon H3 dimetylowany w Lys4.

Immunogen

Epitop: Dimetylowana Lys4

Liniowy peptyd sprzężony z KLH odpowiadający histonowi H3 metylowanemu w Lys4.

Zastosowanie

Analiza immunocytochemiczna:
Rozcieńczenie 1:500 z reprezentatywnej partii wykryło histon H3 w komórkach NIH/3T3 i A431.

Analiza Dot Blot:
Rozcieńczenie 1:1000 z reprezentatywnej partii specyficznie wykrywało histon H3 w peptydzie Lys4 dimethyl zmodyfikowanego histonu H3, jednocześnie nie wykrywając potencjalnych reagujących krzyżowo peptydów odpowiadających innym zmodyfikowanym i niezmodyfikowanym histonom.

Analiza immunoprecypitacji chromatyny:
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (1 X 10E6 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 4 µg normalnej IgG (nr kat. 12-370) lub 4 µl anty-dimetylowego histonu H3 (Lys4) (nr kat. ABE250) i zestawu Magna ChIP A/G Kit (nr kat. 17-10085). Pomyślna immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z dimetylo-histonem H3 (Lys4) została zweryfikowana przez qPCR przy użyciu starterów specyficznych dla ludzkiego regionu kodującego GAPDH.
Szczegóły eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A/G (nr kat. 17-10085).

Sekwencjonowanie ChIP
Immunoprecypitację chromatyny przeprowadzono przy użyciu zestawu Magna ChIP HiSens (nr kat. 17-10460), 5 µg reprezentatywnej partii przeciwciała anty-dimetylo-Histone H3 (Lys4) (ABE250), 20 µL kulek Protein A/G i 5e6 usieciowanej chromatyny komórek HeLa, a następnie oczyszczono DNA za pomocą kulek magnetycznych. Biblioteki zostały przygotowane z próbek wejściowych i ChIP DNA przy użyciu standardowych protokołów z adapterami Illumina z kodem kreskowym i analizowane na urządzeniu Illumina HiSeq. Ponad dwanaście milionów odczytów z plików FastQ zmapowano za pomocą programu Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml) po usunięciu znaczników TagDust (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/). Piki zidentyfikowano za pomocą MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/), a piki i odczyty zwizualizowano jako niestandardową ścieżkę w UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu) z plików BigWig i BED.

Anti-dimethyl Histone H3 (Lys4) Antibody to królicze przeciwciało poliklonalne do wykrywania histonu H3 dimetylowanego lizyną 4. To oczyszczone przeciwciało poliklonalne, znane również jako H3K4me2, ma udowodnioną swoistość dot blot (DB) i zostało zatwierdzone w WB, ICC, ChIP.

Research Category
Epigenetics & Nuclear Function

Research Sub Category
Histones

Jakość

Evaluated by Western Blot using HeLa acid extract and recombinant histone proteins.

Western Blot Analysis: 1:1,000 dilution of this antibody detected Histone H3 on 10 µg of HeLa acid extract.

Opis wartości docelowych

~17 kDa obserwowane

Powiązanie

Zastępuje: 04-791

Postać fizyczna

Oczyszczony króliczy poliklonalny w buforze zawierającym 0,1 M Tris-Glicyna (pH 7,4), 150 mM NaCl z 0,05% azydkiem sodu.

Affinity purified

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze 2-8°C od daty otrzymania.

Komentarz do analizy

Kontrola
Ekstrakt kwasu HeLa

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 1
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable