C0255

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

Name: コラゲナーゼ <I>Clostridium histolyticum</I>由来
Brand: SIGMA

purified by chromatography, ≥500 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units), lyophilized powder

別名:

クロストリジオペプチダーゼA

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About This Item

CAS Number:

9001-12-1

EC Number:

3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)

EC Number:

232-582-9

MDL番号:

MFCD00130830

UNSPSCコード:

12352204

NACRES:

NA.54

主要文書

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フォーム

lyophilized powder

比活性

≥500 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

分子量

68-130 kDa

精製方法

chromatography

溶解性

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

その他の活性

Clostripain ≤2.0 U/mg

保管温度

2-8°C

詳細

Collagenase from Clostridium histolyticum comprises of collagenases G and H. Collagenase has N-terminal activator domain and C-terminal peptidase domain. The collagen binding domains (CBD) and polycystic kidney disease-like (PKD-like) domain resides in the peptidase domain. The collagenase module undergoes structural changes upon calcium binding.

アプリケーション

Collagenase from Clostridium histolyticum has been used:

for the recovery of neutrophils from collagen gels
for the dissociation of breast tumor biopsies into single cells
for the isolation of primary human endometrial stromal cells(HESC) from endometrial biopsies

Collagenase from Clostridium histolyticum may be used for the isolation of cells from many types of animal tissue. It may be used for the disaggregation of human tumor, mouse kidney, human adult/fetal brain, lung and many other tissues. It may also be used in liver and kidney perfusion studies, for the digestion of pancreas, isolation of nonparenchymal rat liver cells and for hepatocyte preparation.

生物化学的／生理学的作用

コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。

Crude collagenases are mixtures of enzymes (mostly proteases) secreted by C. histolyticum. Effective release of cells from tissue requires the action of both collagenase enzymes and the neutral protease. Collagenase is activated by four gram atom calcium (Ca²⁺) per mole enzyme. The culture filtrate is thought to contain at least 7 different proteases ranging in molecular weight from 68-130 kDa.

包装

Product sold on the basis of collagen digestion units (CDU).

単位の定義

1 コラーゲン消化単位（CDU）は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり　1.0 umol　の BAEE を加水分解します。