Pufry HPLC

Pufry jsou roztoky slabé kyseliny a její konjugované zásady nebo slabé zásady a její konjugované kyseliny. V analytické chemii se pufry obvykle používají při vysokoúčinné kapalinové chromatografii s obrácenou fází (RP-HPLC), pokud vzorek obsahuje kyselé nebo zásadité funkční skupiny. Pufry zmírňují vliv vodíkových/hydroniových a hydroxidových iontů a následně snižují kolísání pH.
Products
Související zdroje
- Brochure: LC-MS Resource Guide
A Comprehensive Portfolio for Consistent Results in Routine and Advanced LC-MS applications
- Kalkulačka převodu metody HPLC
Snadný přenos metody mezi kolonami HPLC (od mikrootvorů po preparativní rozsah) na základě rozměrů 2 kolon a aktuálních podmínek metody.
Pufry mobilní fáze
Vhodný výběr pufru, pokud jde o pufrovací druh, iontovou sílu a pH, je nejkritičtějším krokem při vývoji metod RP-HPLC pro iontové analyty. Na retenci iontových analytů v RP-HPLC má zásadní vliv pH mobilní fáze. Řízení pH mobilní fáze v RP-HPLC je tedy jedním z nejdůležitějších parametrů pro účinnou separaci analytů.
Obvyklý rozsah pH pro separace na obrácené fázi na kolonách na bázi oxidu křemičitého se pohybuje v rozmezí 2 až 8. Při separaci iontů na kolonách na bázi oxidu křemičitého se pH pohybuje v rozmezí 1 až 2. Pufr musí mít pKa blízké požadovanému pH, protože pufry nejlépe regulují pH při svém pKa. Jako pravidlo platí, že ideální je zvolit pufr s hodnotou pKa <2 jednotek požadovaného pH mobilní fáze. Nabízíme pufry třídy HPLC pro široký rozsah pH pro všechny vaše laboratorní chromatografické požadavky.
Faktory, které je třeba zvážit při výběru pufru HPLC
Chemická čistota.
Kvalita přísad mobilní fáze (pufrů, solí, kyselin a zásad) spolu s organickými rozpouštědly používanými v experimentu HPLC musí být přizpůsobena citlivosti detektoru a elučnímu protokolu. Pro optimální chromatografii se doporučují vysoce kvalitní rozpouštědla a činidla.
Chemická kompatibilita
Složení pufru spolu s pH mobilní fáze musí být zvoleno v souladu s materiálem pouzdra kolony a povahou stacionární fáze. Tím se zabrání poškození hardwaru a lože kolony.
Rozpustnost pufru
Pufr by měl být v ideálním případě zcela rozpustný ve vodě a neměl by se srážet. Koncentrace pufru musí být pečlivě zvolena, aby nedocházelo ke srážení při vyšších koncentracích, kdy se pufr mísí s organickým rozpouštědlem. Pokud se zanedbá, může to způsobit provozní problémy v čerpadlech a podnítit zablokování kolony HPLC.
Síla pufru
Eluent vykazující slabou interakci se stacionární fází je schopen eluovat z kolony pouze slabě vázané analyty, zatímco silná interakce způsobuje eluci silně vázaných molekul vzorku. Eluce nebo síla rozpouštědla různých rozpouštědel závisí na typu použité stacionární fáze. Po eluční síle hraje důležitou roli viskozita a UV absorbance pufru z hlediska jejich vhodnosti pro použití v HPLC analýzách.
Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?