WTA2

Kit completo de amplificação de transcriptoma total

DNA polymerase included, Complete Kit with optimized enzyme to amplify total RNA in <4 hours, no 3′ bias

• Sinônimo(s): transcriptome amplification kit
• Código UNSPSC: 41121800
• NACRES: NA.55

Propriedades

• Nível de qualidade: 200
• técnica(s): whole genome amplification: suitable
• Condições de expedição: wet ice
• temperatura de armazenamento: −20°C

Descrição

Descrição geral

WTA2 é otimizado para amplificar RNA a partir de amostras fixadas em formalina e embebidas em parafina (FFPE) e outras amostras danificadas ou degradadas. A tecnologia de amplificação de transcriptoma total (WTA) possibilita a amplificação representativa de baixas quantidades de RNA total, na faixa de nanogramas, em menos de 4 horas e sem viés para 3′. Os produtos de amplificação são adequados para aplicações como qPCR, análise de microarray e clonagem. O kit WTA2 contém a polimerase necessária para amplificar a biblioteca de cDNA.

Aplicação

Adequado para uso em aplicações a jusante, incluindo:

• qPCR
• análise de microarray
• clonagem

O kit completo de amplificação de transcriptoma total é usado nas seguintes aplicações:

• Estabelecer um protocolo para a análise simultânea de vírus de DNA e RNA presentes nas fezes de suínos usando sequenciamento profundo controlado por processo.
• Transcrição reversa e amplificação de cDN
• Para a síntese e amplificação da biblioteca de cDNA usando RNA genômico liberado de partículas de PPV imunocapturadas
• Preparação de ácidos nucleicos e sequenciamento profundo (os ácidos nucleicos extraídos foram preparados aleatoriamente para a síntese de cDNA)

Características e benefícios

• Consiga uma amplificação de até 10.000 vezes em menos de 4 horas com menos de 30 minutos de trabalho
• Apenas 20 pg de molde de RNA total são necessários para amplificação de cDNA adequada para perfil de microarray
• Contém todos os componentes necessários para amplificar cDNA
• Consiga amplificação linear de éxons e genes expressos sem viés para 3′ ou 5′
• Amplifica efetivamente o RNA de uma única célula ou em pequena quantidade, inclusive mRNA e RNA total de qualquer animal, planta ou microrganismo

Princípio

O processo de WTA2 tem duas etapas. Na primeira etapa, o RNA da amostra é transcrito reversamente com primers não autocomplementares formados por uma extremidade 3′ quase aleatória e uma extremidade 5′ universal. Durante esse processo, as fitas simples deslocadas funcionam como novos moldes para anelamento e extensão do primer. A biblioteca de cDNA resultante consiste em fragmentos de 100-1000 bases aleatórios e sobrepostos flanqueados por extremidades de sequência universal. A segunda etapa amplifica a biblioteca de cDNA por PCR usando a polimerase de WTA2 e um primer de extremidade universal para formar o produto de WTA2.

Componentes do kit também disponíveis separadamente

• Library Synthesis Enzyme
• Library Synthesis Solution
• Amplification Mix
• Library Synthesis Buffer
• W4502 Water, Nuclease-Free Water, for Molecular Biology
• Amplification Enzyme
• D7295 Deoxynucleotide Mix, 10 mM, Molecular Biology Reagent

Informações de segurança

• Código de classe de armazenamento: 10 - Combustible liquids