Testes de biocarga

 Fundamentos dos testes de biocarga

Os testes de biocarga ou testes microbianos são um processo de controle de qualidade que detecta e quantifica a contaminação microbiana de um produto em diferentes estágios de produção, ou seja, desde a fabricação inicial até a distribuição final. O controle de qualidade eficaz e resultados de teste precisos são essenciais para minimizar os riscos para os consumidores e são exigidos para ambientes de produção regulados. Assim, a análise de biocarga é frequentemente incluída nos testes de rotina para garantir a segurança, a qualidade e a conformidade regulatória de cada lote de produto.

O teste de biocarga é realizado para dispositivos médicos, produtos farmacêuticos, alimentos e bebidas, água, embalagens, matérias-primas, tecido humano, tecido animal e cosméticos. Ao seguir qualquer um dos métodos padrão descritos abaixo, é importante garantir que o método de teste não introduza nem elimine bactérias na amostra de teste.

• Método de filtração por membrana para testes de biocarga
• Métodos de plaqueamento direto para testes de biocarga
• Método de número mais provável (most probable number (MPN)) para testes de biocarga

Método de filtração por membrana para testes de biocarga 

A filtração por membrana método preferido para produtos que contêm substâncias antimicrobianas. Neste método, a amostra é passada através de um filtro de membrana com tamanho de poro de 0,45 µm. A membrana funciona como uma barreira e captura microrganismos maiores que o tamanho dos poros da membrana. Durante a filtração, um vácuo pode ser usado para acelerar o processo. A membrana é transferida, em seguida, para um meio de cultura e colocada em uma incubadora por pelo menos 5 dias a 30 °C a 35 °C para detecção bacteriana e a 20 °C a 25 °C para detecção fúngica. A cultura resultante é adicionalmente contada para determinar os níveis de contaminação microbiana na amostra. Devem ser tomadas medidas apropriadas para evitar a contaminação cruzada que possa levar a resultados falso-positivos.

Métodos de plaqueamento direto para testes de biocarga

Os métodos de plaqueamento direto para testes de biocarga incluem verter (pour-plate) e espalhar (spread-plate) na placa. O método de verter na placa é preferido devido à sua maior precisão teórica. No método de verter na placa, o meio de cultura esterilizado é adicionado a uma placa de Petri contendo a amostra em teste e deixado solidificar. Por outro lado, no método de espalhar na placa a amostra é adicionada a uma placa de Petri contendo meio de cultura estéril e solidificado. Independentemente do método, após a amostra ter sido adicionada ao sistema de cultura, a placa é incubada e a cultura resultante é contada.

Método de número mais provável (most probable number (MPN)) para testes de biocarga

O método de número mais provável (MPN) é um método quantitativo usado para determinar a concentração bacteriana aproximada em uma amostra. A solução ou amostra original é subdividida por ordens de magnitude (frequentemente 10× ou 2×) em caldo de cultura e avaliada quanto à presença ou ausência de microrganismos. A desvantagem do método de MPN é que ele requer um grande número de réplicas na diluição adequada para diminuir os intervalos de confiança. Além disso, o método só é eficaz para avaliar bactérias e não fornece resultados confiáveis para contagem de fungos.