Allgemeine Beschreibung
FastStart™ Taq-DNA-Polymerase ist ein vielseitiges Enzym, das für zahlreiche Anwendungen und auf verschiedenen Geräteplattformen eingesetzt werden kann. Diese modifizierte, thermostabile rekombinante Taq-DNA-Polymerase ist bei Temperaturen unter +75 °C inaktiv, wird jedoch durch einen 2- bis 4-minütigen Hitzeaktivierungsschritt bei +95 °C aktiviert. Da die FastStart™ Taq-DNA-Polymerase bei niedrigen Temperaturen inaktiv ist, kann sie unspezifische Primer-Template-Hybride, die sich bei diesen Temperaturen bilden können, nicht verlängern. Die FastStart™ Taq-DNA-Polymerase ist ein ideales Hilfsmittel für die Heißstart-PCR, da das Enzym während des PCR-Setups und vor dem anfänglichen Denaturierungsschritt inaktiv bleibt.
Anwendung
FastStart
™ Taq-DNA-Polymerase ist eine thermostabile, chemisch modifizierte Form einer rekombinanten Taq-DNA-Polymerase. Das Enzym ist während des PCR-Setups bei +15 bis +25 °C inaktiv und wird dann bei +95 °C während der anfänglichen Denaturierung aktiviert. Dieses Enzym liefert aufgrund seines einzigartigen Enzymdesigns und des optimierten Puffersystems hervorragende Ergebnisse. Die FastStart Taq-DNA-Polymerase ist ein ideales Hilfsmittel für die Heißstart-PCR, da das Enzym während des PCR-Setups und vor dem anfänglichen Denaturierungsschritt inaktiv bleibt.
Sie kann für folgende Anwendungen eingesetzt werden:
- PCR
- Multiplex-PCR
- Schwierige Templates, z. B. Sekundärstrukturen oder GC-reiche Sequenzen
- Automatisierte PCR, z. B. Verarbeitung bei Raumtemperatur
- Heißstart-PCR bis zu 3 kb
- Heißstart-RT-PCR bis zu 3 kb
- Quantitative reverse Transkriptions-PCR (RT-qPCR)
- Bisulfit-spezifische PCR
Verwenden Sie FastStart
™ Taq-DNA-Polymerase dNTPack mit gebrauchsfertiger PCR-Nukleotidmischung. Für optimale Arbeitserleichterung steht der zweifach konzentrierte, gebrauchsfertige FastStart
™ PCR Master zur Verfügung.
Leistungsmerkmale und Vorteile
Die FastStart Taq-DNA-Polymerase ist eine modifizierte rekombinante Taq-DNA-Polymerase, die bei Temperaturen unter +75 °C inaktiv ist. Das Kit beinhaltet einen optimierten PCR-Puffer und eine GC-RICH-Lösung zur Handhabung eines breiten Spektrums von Templates. Die hohe Enzymstabilität ermöglicht die Anwendung automatisierter Pipettierstationen.
- Höhere Spezifität, Sensitivität und Ausbeute:
Heißstart-PCR vereinfacht das PCR-Setup.
Die Enzymmischung ist 24 Stunden bei +15 bis +25 °C stabil.
- Schutz vor Kontamination durch PCR-Verschleppung.
Einbau von dUTP und Vorbehandlung der PCR-Mastermischungen mit Uracil-DNA-Glykosylase
- Optimiertes Polymerasekettenreaktion(PCR)-Puffersystem und eine GC-RICH-Lösung zur Handhabung eines breiten Spektrums von Templates
- Hervorragende Ergebnisse aufgrund seines einzigartigen Enzymdesigns und optimierten Puffersystems
Qualität
Jede Charge wird mit humangenomischer DNA und Primern, die spezifisch für das 365 bp-Fragment des menschlichen tPA-Gens sind, und einem 284 bp-Fragment des Apo E-Gens mit 74 % GC-Gehalt einem Funktionstest unterzogen. Jede Charge wird auch auf die Abwesenheit von Exo- und Endonukleasen sowie Nicking-Aktivität getestet.
Einheitendefinition
1 μg M13mp9ss DNA, 0,3 μg M13 Sequenzierungsprimer und 0,1 μCi [α--32P] dCTP werden mit unterschiedlichen Mengen an FastStart Taq-DNA-Polymerase-Einheiten in 50 μl Inkubationspuffer bei +65 °C 60 min inkubiert. Die Menge der eingebauten dNTPs wird mittels Trichloressigsäurepräzipitation bestimmt.
Assay: 1 μg M13mp9ss DNA, 0,3 μg M13 Sequenzierungsprimer und 0,1 μCi [α--32P] dCTP werden mit unterschiedlichen Mengen an FastStart Taq-DNA-Polymerase-Einheiten in 50 μl Inkubationspuffer bei +65 °C 60 min inkubiert. Die Menge der eingebauten dNTPs wird mittels Trichloressigsäurepräzipitation bestimmt.
Volumenaktivität: 5 U/μl
Rechtliche Hinweise
HINWEIS FÜR DEN KÄUFER: BESCHRÄNKTE LIZENZ<br />Die Verwendung dieses Produkts unterliegt dem US-Patent Nr. 6,127,155 und den entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Human- oder veterinärdiagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Alle anderen Verwendungen, die keine interne Forschung und keine human- und veterinärdiagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen sind, erfordern eine gesonderte Lizenz von Thermo Fisher Scientific. Weitergehende Informationen zum Erwerb von Lizenzen von Roche erhalten Sie von der Lizenzabteilung von Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA oder Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Straße 116, 68305 Mannheim, Deutschland. Weitere Informationen zum Erwerb von Lizenzen von Thermo Fisher Scientific erhalten Sie von der Lizenzabteilung von Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.</ br>HINWEIS AN DEN KÄUFER: BESCHRÄNKTE LIZENZ<br />Die Verwendung dieses Produkts unterliegt den US-Patenten Nr. 5,677,152 und 5,773,258 sowie den entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Human- oder veterinärdiagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Alle anderen Verwendungen, die keine interne Forschung und keine human- und veterinärdiagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen sind, erfordern eine gesonderte Lizenz von Thermo Fisher Scientific. Weitergehende Informationen zum Erwerb von Lizenzen von Roche erhalten Sie von der Lizenzabteilung von Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA oder Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Straße 116, 68305 Mannheim, Deutschland. Weitere Informationen zum Erwerb von Lizenzen von Thermo Fisher Scientific erhalten Sie von der Lizenzabteilung von Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.
FastStart is a trademark of Roche