Enzymy pro analýzu léčiv

Většina léčiv, hormonů a xenobiotik je v lidském a zvířecím těle metabolizována na hydrofilní molekuly a poté rychle vylučována do tělních tekutin, především do moči. Tyto konjugované léky a molekuly jsou většinou konjugovány s glukuronidy nebo sulfáty (glukuronogonjugáty a sulfonakonjugáty). U člověka je glukuronidace hlavní metabolickou cestou fáze II. Konjugáty se obtížně detekují a kvantifikují chromatografickými přístroji, plynovou chromatografií (GCMS) a kapalinovou chromatografií (LCMS). Hydrolýza pomocí beta-glukuronidázy a/nebo sulfatázy štěpí konjugované vazby a vrací léčiva, hormony a xenobiotika zpět do jejich původní volné formy. Uvolněné analyty jsou snadno "viditelné" a měřitelné laboratorními přístroji pro screening nebo kvantifikaci.  

Beta-glukuronidázové enzymy jsou k dispozici pro přírodovědný a diagnostický průmysl již více než pět desetiletí, a to především extrahované z vnitřností různých živočichů (Helix pomatia nebo Haliotis rufescens) nebo bakteriálních zdrojů (E. coli). Od roku 2015 dochází k přechodu na rekombinantní beta-glukuronidázy v analytické toxikologii a rutinním testování drog v moči. Díky lepší analytické kvalitě, snadné přípravě vzorků, zkrácení inkubační doby a možnosti automatizace se naše rekombinantní enzymy beta-glukuronidázy (SRE0093, SRE0095) se stále častěji používají jako analytické enzymy v mnoha oblastech použití. 

Oblasti použití beta-glukuronidázy a sulfatázy jako analytických enzymů

Hlavní rutinní aplikací beta-glukuronidázy a sulfatázy je testování drog v moči (UDT). Enzymy používané při UDT se uplatňují při různých typech testování:

• Forenzní testování drog (trestní soudnictví)
• Lidské antidopingové testování (soutěžní sporty)
• Zvířecí antidoping (soutěžní dostihy)
• Testování drog na pracovišti (noví zaměstnanci)
• Testování expozice xenobiotikům (expozice prostředí)
• Monitorování léčiv na předpis a terapeutických léčiv (compliance a doprovodné testy)

Efektivní a úplná hydrolýza glukuronidových a sulfátových metabolitů má zásadní význam pro testování drog v moči, zejména pokud je zapotřebí kvantifikace. Dlouhá historie akademického výzkumu odhalila v přírodě mnoho forem beta-glukuronidázy a sulfatázy, z nichž každá má specifické vlastnosti. Jedním z nejvlivnějších parametrů týkajících se aktivity enzymů je pH. Jako pomůcku při výběru enzymů si můžete prohlédnout naši tabulku optimálního rozmezí pH se seznamem pH optima pro různé enzymy glukuronidázy z běžných zdrojů.

Na našich pracovištích se nativní a rekombinantní beta-glukuronidázy vyrábějí od roku 1960. Všechny naše beta-glukuronidázy a arylsulfatázy jsou vyráběny v rámci systému jakosti ISO9001. I nadále věnujeme své úsilí tomu, aby byla hydrolýza rychlejší, snadněji proveditelná a připravená k použití.

Související literatura k produktu

Využití UHPLC/MS (TOF) pro detekci léčiv a metabolitů v moči po optimalizovaných podmínkách enzymové hydrolýzy
Vyhodnocení různých enzymů na účinnost hydrolýzy glukuronidových metabolitů léčiv v moči