Kits para ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA)
Um ELISA (ensaio de imunoabsorção enzimática) é um imunoensaio feito com placas de vários poços dentro dos quais um dos componentes do ensaio, tipicamente um anticorpo ou amostra, é adsorvido sobre uma superfície sólida, neste caso, uma placa. Oferecendo detecção rápida, quantitativa e sensível de analitos a um custo relativamente baixo, os ELISAs representam um dos formatos de ensaio mais simples de executar. Além disso, a facilidade de adaptar um ELISA a um método de triagem de alto rendimento permite que pesquisadores testem grandes números de amostras em uma única corrida.
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ELISAs sanduíche, diretos e competitivos
Os nossos ELISAs são um método conveniente e intuitivo para estudar biomarcadores de proteínas solúveis em diversas matrizes, incluindo soro, plasma, sobrenadante de cultura celular ou lisado. Nossa oferta de ELISA consiste de >1.000 ensaios exclusivos para uso em pesquisa para analisar diversas espécies, incluindo modelos humanos, camundongos, ratos e vários outros animais (de criação e de estimação). Cada ensaio acompanha um protocolo específico e os reagentes necessários para correr uma placa de 96 poços. Os ELISAs existem primordialmente em um formato de 96 poços no qual o fornecedor disponibiliza os reagentes necessários para detectar e quantificar o alvo. Há uma variedade de métodos de ELISA, incluindo de sanduíche, direto e competitivo.
O ensaio sanduíche usa um par de anticorpos monoclonais (mAbs) contra diferentes epítopos contra o mesmo alvo. O mAb primário, ligado à placa, retira a proteína da solução, enquanto o segundo mAb é usado para completar o "sanduíche" e fornecer o sinal que indicará a presença do alvo. Uma quantidade conhecida da versão recombinante da proteína é fornecida com o kit, permitindo que o usuário crie uma curva padrão em relação à qual o sinal de uma das amostras será interpretado. A maior parte do nosso portfólio está neste formato de ELISA sanduíche.
Os ensaios de ELISA direto e competitivo são mais raros. O ensaio direto usa um único mAb para detectar a amostra que está ligada à placa. O mAB é, em seguida, ligado por um anticorpo secundário repórter para fornecer o sinal.
O ensaio competitivo tem uma quantidade conhecida do biomarcador pré-ligado à placa. Um anticorpo marcado é incubado concomitantemente com a amostra que "absorve" o anticorpo, dependendo da concentração do alvo na amostra. O anticorpo livre é, em seguida, capaz de se ligar ao antígeno na placa e fornecer um sinal depois que a amostra é removida por lavagem. Neste caso, o sinal é inversamente proporcional à concentração do biomarcador-alvo.
ELISAs Conferma™ e software de ajuste de curva para imunoensaios Belysa®
A marca de ELISA Conferma™ consiste em ensaios sanduíche projetados para minimizar a variabilidade entre lotes no nível crítico de reagentes, uma preocupação importante dos usuários de ensaios. A avaliação de lotes individuais de reagentes críticos com uma gama de técnicas analíticas alinhadas com um protocolo detalhado de controle de qualidade (CQ) nos permite controlar e limitar a variabilidade ao longo do tempo.
Para permitir que os cientistas avaliem a reprodutibilidade de seus métodos, criamos ainda o software de ajuste de curva para imunoensaios Belysa®. Com esta ferramenta, o usuário pode avaliar seu imunoensaio sanduíche para garantir que parâmetros como % do CV (coeficiente de variação) e % de recuperação estejam de acordo com o esperado. Em seguida, ele pode comparar as curvas padrão de várias placas para confirmar a consistência do seu método.
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